Terreno cromogenico per la ricerca ed il conteggio di Escherichia coli 20 piastre da 90 mm

ChromaticTM Coli Coliform è un terreno cromogenico selettivo utilizzato per la ricerca ed il conteggio di

E. coli β-glucuronidasi positivo e di batteri coliformi in campioni alimentari e nell’acqua.

FORMULA TIPICA (g/l)

Peptone 15.0

Estratto di Lievito 3.0

Sodio Cloruro 5.0

Miscela Cromogenica e Selettiva 1.7

Agar 15.0

pH Finale 7.2 ± 0.2 a 25°C

PRINCIPIO DEL METODO

Il peptone fornisce aminoacidi, azoto, carbonio, vitamine e minerali per la crescita degli organismi. L’estratto di

lievito è una fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il sodio cloruro mantiene il bilancio osmotico del terreno.

La miscela cromogenica e selettiva permette di identificare i microrganismi sulla base del colore e della morfologia

delle colonie inibendo contemporaneamente la maggior parte dei batteri Gram positivi. L’agar è l’agente solidificante.

PREPARAZIONE

Terreno disidratato Sospendere 39.7 g di polvere in 1 litro di acqua distillata o deionizzata sterile. Mescolare

bene. Riscaldare agitando di frequente e bollire fino a completa dissoluzione. NON AUTOCLAVARE.

Terreno in flaconi Sciogliere il contenuto di una flacone in bagnomaria a 100°C (con i tappi leggermente svitati)

fino a completa dissoluzione del terreno. Verificare, una volta fuso, la buona omogeneità del

terreno capovolgendo il flacone dopo averne avvitato il tappo. Raffreddare a 45-50°C,

mescolare bene senza formazione di bolle. Versare in piastre Petri in condizioni di asepsi.

PROCEDURA DEL TEST

Inoculare i campioni solidi strisciando direttamente sulla superficie del terreno.

I campioni liquidi possono essere inoculati con i metodi di spatolamento, inclusione o con la tecnica delle

membrane filtranti.

Utilizzare le piastre RODAC per il campionamento delle superfici ponendo a contatto e premendo il terreno sull’area

da testare.

Incubare a 35 ± 2°C per 18-24 ore in atmosfera aerobica.

Le condizioni di incubazione possono variare in base all’obbiettivo dell’analisi:

• 44 ± 1°C per 24 ± 2 ore se la ricerca è focalizzata sui batteri coliformi fecali:

• 30 ± 1°C for 24-48 ore massimizzare la capacità di rivelazione dei coliformi totali.

INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI

Dopo l’incubazione osservare il colore e la morfologia delle colonie ed interpretare i risultati come indicato nella

tabella ID.

Tabella ID.

Microrganismo Colore delle colonie tipiche

E. coli* Verde

Altri batteri coliformi Malva

Altri batteri (se non inibiti) Incolore

*Ceppi di E. coli β-glucuronidasi negativi, come ad esempio E. coli O157, sono incolori su questo terreno.