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ChromaticTM Coli Coliform è un terreno cromogenico selettivo utilizzato per la ricerca ed il conteggio di
E. coli β-glucuronidasi positivo e di batteri coliformi in campioni alimentari e nell’acqua.
FORMULA TIPICA (g/l)
Peptone 15.0
Estratto di Lievito 3.0
Sodio Cloruro 5.0
Miscela Cromogenica e Selettiva 1.7
Agar 15.0
pH Finale 7.2 ± 0.2 a 25°C
PRINCIPIO DEL METODO
Il peptone fornisce aminoacidi, azoto, carbonio, vitamine e minerali per la crescita degli organismi. L’estratto di
lievito è una fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il sodio cloruro mantiene il bilancio osmotico del terreno.
La miscela cromogenica e selettiva permette di identificare i microrganismi sulla base del colore e della morfologia
delle colonie inibendo contemporaneamente la maggior parte dei batteri Gram positivi. L’agar è l’agente solidificante.
PREPARAZIONE
Terreno disidratato Sospendere 39.7 g di polvere in 1 litro di acqua distillata o deionizzata sterile. Mescolare
bene. Riscaldare agitando di frequente e bollire fino a completa dissoluzione. NON AUTOCLAVARE.
Terreno in flaconi Sciogliere il contenuto di una flacone in bagnomaria a 100°C (con i tappi leggermente svitati)
fino a completa dissoluzione del terreno. Verificare, una volta fuso, la buona omogeneità del
terreno capovolgendo il flacone dopo averne avvitato il tappo. Raffreddare a 45-50°C,
mescolare bene senza formazione di bolle. Versare in piastre Petri in condizioni di asepsi.
PROCEDURA DEL TEST
Inoculare i campioni solidi strisciando direttamente sulla superficie del terreno.
I campioni liquidi possono essere inoculati con i metodi di spatolamento, inclusione o con la tecnica delle
membrane filtranti.
Utilizzare le piastre RODAC per il campionamento delle superfici ponendo a contatto e premendo il terreno sull’area
da testare.
Incubare a 35 ± 2°C per 18-24 ore in atmosfera aerobica.
Le condizioni di incubazione possono variare in base all’obbiettivo dell’analisi:
• 44 ± 1°C per 24 ± 2 ore se la ricerca è focalizzata sui batteri coliformi fecali:
• 30 ± 1°C for 24-48 ore massimizzare la capacità di rivelazione dei coliformi totali.
INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI
Dopo l’incubazione osservare il colore e la morfologia delle colonie ed interpretare i risultati come indicato nella
tabella ID.
Tabella ID.
Microrganismo Colore delle colonie tipiche
E. coli* Verde
Altri batteri coliformi Malva
Altri batteri (se non inibiti) Incolore
*Ceppi di E. coli β-glucuronidasi negativi, come ad esempio E. coli O157, sono incolori su questo terreno.
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