Chromatic™ MH – Mueller Hinton cromogénico para diferenciación microbiana y antibiograma

Descripción
Chromatic™ MH es un medio cromogénico a base de Mueller Hinton utilizado para la diferenciación microbiana en simultáneo con el antibiograma para diferentes microorganismos directamente de muestras clínicas. El antibiograma está optimizado para bacterias Gram negativas.

Fórmula típica (g/l)

Extracto de carne 2.0
Hidrolizado ácido de caseína 17.5
Almidón 1.5
Mezcla cromogénica 0.5
Agar 17.0
pH final 7.3 ± 0.2 a 25°C

Principio del método

El hidrolizado ácido de caseína y el extracto de carne proporcionan aminoácidos, nitrógeno, carbono, minerales, vitaminas y otros nutrientes esenciales para el crecimiento de los microorganismos. El almidón actúa como coloide protector contra moléculas tóxicas y, con su hidrólisis en autoclave, proporciona una pequeña cantidad de glucosa como fuente de energía.

La mezcla cromogénica permite identificar los microorganismos según el color y la morfología de las colonias. El agar actúa como agente solidificante.

El método Kirby-Bauer se basa en la difusión del antimicrobiano a través del agar. Cada disco de papel contiene una concentración específica de agente antimicrobiano, que inhibe el crecimiento del microorganismo formando un halo alrededor del disco. El diámetro del halo de inhibición está correlacionado con la mínima concentración inhibitoria (MIC).

El método Striscia con Gradiente es un análisis cuantitativo para la determinación de la MIC de un agente antimicrobiano y para la identificación de mecanismos de resistencia. La tira contiene un gradiente exponencial del agente antimicrobiano y se coloca sobre la superficie de la placa inoculada. El valor de MIC se lee donde el borde de la elipse de inhibición interseca la tira.

Chromatic™ MH Agar está formulado con bajos niveles de timina y timidina y niveles controlados de iones de calcio y magnesio.

Preparación

Para el medio deshidratado, suspender 38.5 g de polvo en 1 litro de agua destilada o deionizada estéril, mezclar bien y calentar hasta completa disolución. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos, enfriar a 45-50°C y dispensar en placas de Petri en condiciones de asepsia.

Procedimiento de la prueba

Inocular la placa arrastrando directamente 10 µl de muestra sobre la superficie del agar. Si es necesario, diluir la muestra en solución salina y mezclar con vortex antes de la siembra.
Aplicar los discos antimicrobianos o las MIC Test Strip sobre la superficie de la placa inoculada.
Incubar a 37°C durante 18-24 horas en atmósfera aeróbica.

Interpretación de los resultados

Después de la incubación, observar el color de las colonias e interpretar los resultados según la tabla ID.

Microorganismos y color típico de las colonias:
E. coli rosa-rojizo-malva
Klebsiella spp, Enterobacter spp, Serratia spp verde-azul
Proteus spp marrón
Pseudomonas spp amarillento-verde
S. aureus crema
E. faecalis verde-turquesa

Para el antibiograma, medir el diámetro de la zona de inhibición alrededor del disco o leer el valor de MIC. Interpretar los diámetros de las zonas de inhibición o los valores de MIC según los estándares actuales y clasificar el microorganismo como sensible, intermedio o resistente a los agentes probados.

Aspecto y conservación

Medio deshidratado: fino, seco, homogéneo, beige
Medio preparado: ámbar, ligeramente opalescente

El polvo es altamente higroscópico y debe ser almacenado a 10-30°C en un ambiente seco, en el recipiente original cerrado herméticamente. Las placas listas deben ser almacenadas a 2-8°C protegidas de la luz. No utilizar el producto después de la fecha de caducidad o si muestra signos de contaminación o deterioro.

Duración

Medio deshidratado: 4 años
Placas listas para usar: 4 meses

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