Chromatic™ MH – Mueller Hinton cromogenico per differenziazione microbica e antibiogramma

Descrizione
Chromatic™ MH è un terreno cromogenico a base Mueller Hinton utilizzato per la differenziazione microbica in contemporanea con l’antibiogramma per diversi microrganismi direttamente da campioni clinici. L’antibiogramma è ottimizzato per batteri Gram negativi.

Formula tipica (g/l)

Estratto di carne 2.0
Idrolizzato acido di caseina 17.5
Amido 1.5
Miscela cromogenica 0.5
Agar 17.0
pH finale 7.3 ± 0.2 a 25°C

Principio del metodo

L’idrolizzato acido di caseina e l’estratto di carne forniscono amminoacidi, azoto, carbonio, minerali, vitamine e altri nutrienti essenziali per la crescita dei microrganismi. L’amido agisce come colloide protettivo contro molecole tossiche e, con la sua idrolisi in autoclave, fornisce una piccola quantità di glucosio come fonte di energia.

La miscela cromogenica permette di identificare i microrganismi in base al colore e alla morfologia delle colonie. L’agar agisce come agente solidificante.

Il metodo Kirby-Bauer si basa sulla diffusione dell’antimicrobico attraverso l’agar. Ciascun disco di carta contiene una specifica concentrazione di agente antimicrobico, che inibisce la crescita del microrganismo formando un alone attorno al disco. Il diametro dell’alone di inibizione è correlato con la minima concentrazione inibente (MIC).

Il metodo Striscia con Gradiente è un’analisi quantitativa per la determinazione della MIC di un agente antimicrobico e per l’individuazione di meccanismi di resistenza. La striscia contiene un gradiente esponenziale dell’agente antimicrobico e viene posizionata sulla superficie della piastra inoculata. Il valore di MIC viene letto dove il bordo dell’ellisse di inibizione interseca la striscia.

Chromatic™ MH Agar è formulato con bassi livelli di timina e timidina e livelli controllati di ioni calcio e magnesio.

Preparazione

Per il terreno disidratato, sospendere 38.5 g di polvere in 1 litro di acqua distillata o deionizzata sterile, mescolare bene e riscaldare fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121°C per 15 minuti, raffreddare a 45-50°C e dispensare in piastre Petri in condizioni di asepsi.

Procedura del test

Inoculare la piastra strisciando direttamente 10 µl di campione sulla superficie dell’agar. Se necessario, diluire il campione in soluzione fisiologica e miscelare con vortex prima della semina.
Applicare i dischi antimicrobici o le MIC Test Strip sulla superficie della piastra inoculata.
Incubare a 37°C per 18-24 ore in atmosfera aerobica.

Interpretazione dei risultati

Dopo l’incubazione, osservare il colore delle colonie e interpretare i risultati in base alla tabella ID.

Microrganismi e colore tipico delle colonie:
E. coli rosa-rossastro-malva
Klebsiella spp, Enterobacter spp, Serratia spp verde-blu
Proteus spp marrone
Pseudomonas spp giallastro-verde
S. aureus crema
E. faecalis verde-turchese

Per l’antibiogramma, misurare il diametro della zona di inibizione attorno al disco o leggere il valore di MIC. Interpretare i diametri delle zone di inibizione o i valori di MIC in base agli standard attuali e classificare il microrganismo come sensibile, intermedio o resistente agli agenti testati.

Aspetto e conservazione

Terreno disidratato: fine, asciutto, omogeneo, beige
Terreno preparato: ambra, leggermente opalescente

La polvere è altamente igroscopica e deve essere conservata a 10-30°C in un ambiente asciutto, nel contenitore originale chiuso ermeticamente. Le piastre pronte devono essere conservate a 2-8°C al riparo dalla luce. Non utilizzare il prodotto dopo la data di scadenza o se mostra segni di contaminazione o deterioramento.

Durata

Terreno disidratato: 4 anni
Piastre pronte all’uso: 4 mesi

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